Producción de semillas como insumo agrícola: emprendimientos y asesorías

Metodologías de transformación: biobalística

I. Obtención de organismos transgénicos

  • El método de biobalística o bombardeo de micropartículas sobre células, surgió como una alternativa al sistema Agrobacterium, fundamentalmente por la imposibilidad en tiempos pasados, de hacer actuar esta bacteria sobre células de monocotiledóneas
  • El primer paso para aplicar esta metodología es la preparación del constructo génico
  • Se requiere que el constructo génico se adhiera a micropartículas de oro o tugsteno
  • Para lograr esto, se colocan en una solución azucarada los millones de copia del constructo génico con los millones de micropartículas, naturalmente las moléculas del constructo se adherirán a las micropartículas
  • Para emplear el método de biobalística se requiere de un equipo llamado pistola de biobalística
  • Las micropartículas portando las copias del constructo génico, son colocadas en una sección de la pistola de biobalística que está al vacío
  • Bajo esta sección se colocan las células a transformar
  • Al liberarse el vacío, las micropartículas salen expelidas a grandes velocidades sobre las células, y algunas de ellas romperán paredes celulares, membranas citoplasmáticas, membranas nucleares e incluso ADN, logrando incorporarse el constructo en el ADN de la célula que se desea transformar
  • En las células se verificará la actividad del gen GUS (gen marcador) y el gen selectivo
  • Toda célula vegetal que muestre actividad del gen marcador y el gen selectivo, será colocada en condiciones para que inicie su mitosis
  • Debido a que el constructo génico es parte integral del ADN de la célula vegetal, en la mitosis se dará origen a una célula con el mismo ADN de la célula original, por lo tanto, al lograr un individuo adulto, todas sus células tendrán el gen de interés

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